AAT Bioquest 22837 細(xì)胞計™ APC-Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*

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AAT Bioquest 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 22837 細(xì)胞計™ APC-Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*  100 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：22837

產(chǎn)品名稱：細(xì)胞計™ APC-Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*

產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests

AAT Bioquest 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest 22837 細(xì)胞計™ APC-Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

膜聯(lián)蛋白V可與包括APC在內(nèi)的熒光染料偶聯(lián)。這種形式保留了其對磷脂酰絲an酸（PS）的高親和力，因此可作為正在經(jīng)歷細(xì)胞凋亡的細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)分析的靈敏探針。由于PS的外化發(fā)生在細(xì)胞凋亡的早期階段，APC膜聯(lián)蛋白V染色可以在比基于核變化（如DNA片段化）的測定更早的階段識別細(xì)胞凋亡。APC膜聯(lián)蛋白V染色先于膜完整性的喪失，膜完整性的喪失伴隨著由凋亡或壞死過程引起的細(xì)胞死亡的最新階段。因此，用APC膜聯(lián)蛋白V染色通常與重要染料（如碘化丙啶（PI）或7-氨基放線菌素（7-AAD））結(jié)合使用，以使研究人員能夠識別早期凋亡細(xì)胞。

組件

組分A：APC-膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物—1瓶

組分B：測定緩沖液（4°C）—1 瓶 （50 mL）

組分C：100X碘化丙啶—1 瓶 （100 μL）

1.    用測試化合物制備細(xì)胞（200 μL/樣品）

2.    添加APC-膜聯(lián)蛋白V檢測溶液

3.    在室溫下孵育 20 - 60 分鐘

4.    使用帶有 660/20 nm 濾光片的流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞（APC 通道）

重要說明：在開始實驗之前，在室溫下解凍100X碘化丙啶（組分C）。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1. APC-膜聯(lián)蛋白V儲備溶液（100X）：將200 μL PBS和0.2%BSA加入APC-膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物（組分A）的小瓶中，充分混合制成100X APC-膜聯(lián)蛋白V儲備溶液。

注意：將重組的100X APC-膜聯(lián)蛋白V儲備溶液儲存在4^oC. 不要凍結(jié)。

實驗方案樣本

1.    用測試化合物處理細(xì)胞一段時間（用星形孢菌素處理的Jurkat細(xì)胞為4-6小時）以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。注意：貼壁細(xì)胞的膜聯(lián)蛋白V流式細(xì)胞術(shù)分析不常規(guī)測試，因為在細(xì)胞分離或收獲過程中可能發(fā)生特定的膜損傷。然而，利用膜聯(lián)蛋白V對貼壁細(xì)胞類型進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人報道。

2.    離心細(xì)胞得到1-5×10⁵細(xì)胞/管。

3.    將細(xì)胞重懸于 200 μL 檢測緩沖液（組分 B）中。

4.    向細(xì)胞中加入 2 μL 100X APC-膜聯(lián)蛋白 V 儲備溶液。

5.    自選：將 2 μL 100X 碘化丙啶（組分 C）加入壞死細(xì)胞細(xì)胞中。

6.    在室溫下孵育 20 至 60 分鐘，避光。

7.    自選：在用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞之前，加入 200 至 300 μL 測定緩沖液（組分 B）以增加體積。

8.    使用帶有660/20nm濾光片（APC通道）的流式細(xì)胞儀監(jiān)測APC-膜聯(lián)蛋白V的熒光強度。當(dāng)將碘化丙啶添加到細(xì)胞中時，使用 610/20 nm 濾光片（PE- Texas Red channel）測量細(xì)胞活力。

產(chǎn)品訂購信息：

22837 細(xì)胞計™ APC-Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*  100 Tests