AAT Bioquest 22800 Cell Meter JC-10™ 線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對微孔板檢測進行了優(yōu)化*

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AAT Bioquest 線粒體膜電位檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 22800 Cell Meter JC-10™ 線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對微孔板檢測進行了優(yōu)化*  500 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：22800

產(chǎn)品名稱：Cell Meter JC-10™ 線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對微孔板檢測進行了優(yōu)化*

產(chǎn)品規(guī)格：500 Tests

AAT Bioquest 線粒體膜電位檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest 22800 Cell Meter JC-10™ 線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對微孔板檢測進行了優(yōu)化*  500 Tests，產(chǎn)品說明：

盡管JC-1在許多實驗室中被廣泛使用，但其水溶性差，使其難以用于某些應(yīng)用。即使在1μM濃度下，JC-1也傾向于在水性緩沖液中沉淀。JC-10 已被開發(fā)為需要高染料濃度的 JC-1 的*替代品。與JC-1相比，我們的JC-10具有更好的水溶性。JC-10能夠選擇性地進入線粒體，并隨著膜電位的增加，其顏色從綠色可逆地變?yōu)槌壬?。該特性是由于膜偏振時JC-10聚集體的可逆形成，導致發(fā)射光從520nm（即JC-10單體形式的發(fā)射）到570nm（即J-聚集體的發(fā)射）的偏移。當在490nm處激發(fā)時，隨著線粒體膜變得更加偏振，JC-10的顏色從綠色可逆地變?yōu)榫G橙色。該細胞計™ JC-10 線粒體膜電位檢測試劑盒使您能夠使用簡單的酶標儀監(jiān)測線粒體膜電位變化，而所有其他商用 JC-1 檢測試劑盒需要使用流式細胞儀。我們的試劑盒提供了監(jiān)測線粒體膜電位變化的 zui wen ding 方法，并且可以很容易地用于篩選大型化合物庫。

組件

組件 A：DMSO 中的 100X JC-10—1瓶（250 μL）

組分B：檢測緩沖液A—1瓶（25 mL）

組分C：檢測緩沖液B—1瓶（25 mL）

1.    準備細胞

2.    添加測試化合物

3.    加入 JC-10 染料工作溶液（50 μL/孔/96 孔板或 12.5 μL/孔/384 孔板）

4.    在 37°C、5% CO 下孵育2培養(yǎng)箱 30 至 60 分鐘

5.    添加檢測緩沖液B（50 μL/孔/96孔板或12.5 μL/孔/384孔板）

6.    在Ex/Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）和540/590 nm（截止= 570 nm）下監(jiān)測熒光強度（底部讀取模式）

重要說明：在開始實驗之前，在室溫下解凍所有試劑盒成分。

工作溶液的制備

將 50 μL 100X JC-10（組分 A）加入 5 mL 檢測緩沖液 A（組分 B）中，充分混合制成 JC-10 染料工作溶液。避光。

實驗方案樣本

1.    通過將 10 μL 10X 測試化合物（96 孔板）或 5 μL 5X 測試化合物（384 板）添加到所需緩沖液（例如 PBS 或 HHBS）中來處理細胞。注意：在添加化合物之前不需要清洗細胞。但是，如果測試化合物對血清敏感，則可以在添加化合物之前吸走生長培養(yǎng)基和血清因子。吸液后將相同體積的 HHBS 加入孔中（例如 90 孔板為 96 μL，20 孔板為 384 μL）?；蛘?，細胞可以在無血清培養(yǎng)基中生長。

2.    在室溫或 37°C、5% CO 中孵育細胞板2培養(yǎng)箱至少15分鐘或所需的時間（對于Jurkat細胞，用喜shu堿4-6小時或用星形孢菌素治療3-5小時）誘導細胞凋亡。

3.    向細胞板中加入 50 μL/孔（96 孔板）或 12.5 μL/孔（384 孔板）的 JC-10 染料工作溶液。

4.    將板在 37°C、5% CO 中孵育2培養(yǎng)箱30 - 60分鐘，避光。注意：適當?shù)姆跤龝r間取決于所使用的單個細胞類型和細胞濃度。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

5.    在讀取熒光強度之前，將 50 μL/孔（96 孔板）或 12.5 μL/孔（384 孔板）的檢測緩沖液 B（組分 C）加入 JC-10 染料工作溶液板中。注意：上樣后不要清洗細胞。對于非貼壁細胞，建議在添加測定緩沖液B（組分C）后以800rpm離心細胞板2分鐘，制動器關(guān)閉。

6.    使用熒光酶標儀（底部讀取模式）在Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）和540/590 nm（截止= 570 nm）下監(jiān)測熒光強度以進行比率分析。

產(chǎn)品訂購信息：

22800 Cell Meter JC-10™ 線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對微孔板檢測進行了優(yōu)化*  500 Tests