AAT Bioquest  21190  RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品*

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AAT Bioquest BCFL AM*BCECF zhuo越替代品-常備現(xiàn)貨

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  21190  RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品* 1mg，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：21190

產(chǎn)品名稱：RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品*

產(chǎn)品規(guī)格：1mg

AAT Bioquest BCFL AM*BCECF zhuo越替代品-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  21190  RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品* 1mg，產(chǎn)品說明：

內pH在許多細胞事件中起著重要的調節(jié)作用，包括細胞生長、鈣調節(jié)、酶活性、受體介導的信號轉導、離子轉運、內吞作用、趨化性、細胞粘附和其他細胞過程。近年來，pH敏感熒光染料已廣泛用于監(jiān)測細胞內pH值的變化。使用熒光pH指示劑的成像技術還允許研究人員以更高的空間分辨率和采樣密度研究這些過程，而使用其他技術（如微電極）可以實現(xiàn)。其中，2'，7'-雙-（2-羧乙基）-5-（和-6）-羧基熒光素（BCECF）是 zui shou huan ying 的pH探針，因為它可用于按比例監(jiān)測細胞pH值。然而，所有商用BCECF AM都是至少三種異構體的復雜混合物，批次間的比例不同，使BCECF應用復雜化。BCFL的開發(fā)是為了克服與BCECF AM相關的這種異構體困難。作為BCECF，BCFL表現(xiàn)出pH依賴性的雙激發(fā)，與BCECF基本相同。它的pKa為~7.0，也與BCECF相同。與BCECF一樣，BCFL的雙激發(fā)光譜具有454 nm的等吸點，應使BCFL成為良好的激發(fā)比pH指示劑。BCFL比率成像使細胞內pH測定基本上獨立于幾個可變因素，包括染料濃度，光程長度，細胞泄漏和光漂白率。BCFL，AM是單一異構體，使得pH測量比BCECF，AM更具重現(xiàn)性，BCECF，AM由許多不同的異構體組成。

平臺

熒光顯微鏡

Excitation單一： FITC比率：AmCyan/FITC

Emission單一： FITC比率：AmCyan/FITC

推薦板 黑色墻壁/透明底部

熒光酶標儀

Excitation：430, 505

Emission：535

Cutoff：515

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格：底部讀取模式

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

比率工程™ BCFL AM 庫存解決方案

在高質量無水DMSO中制備10至20 mM的RatioWorks™ BCFL AM儲備溶液。

工作溶液的制備

RatioWorks™ BCFL AM 工作解決方案

在實驗當天，將RatioWorks™ BCFL AM溶解在DMSO中或將指示劑儲備溶液的等分試樣解凍至室溫。在您選擇的緩沖液（例如，Hanks和Hepes緩沖液）中制備5至50μM的RatioWorks™ BCFL AM工作溶液。

注意 非離子洗滌劑Pluronic® F-127可用于增加AM酯的水溶性。在染色緩沖液中，最終的Pluronic® F-127濃度應約為0.02%。各種Pluronic® F-127產(chǎn)品可以從AAT Bioquest購買。避免在Pluronic® F-127存在下長期儲存AM酯。

注意 如果您的細胞含有有機陰離子轉運蛋白，則可以將丙磺shu（1-2 mM）添加到染料工作溶液中（最終孔濃度為0.5-1 mM），以減少脫酯指示劑的泄漏。多種ReadiUse™丙磺shu產(chǎn)品，包括水溶性、鈉鹽和穩(wěn)定溶液，均可從AAT Bioquest購買。

實驗方案樣本

以下是將RatioWorks™ BCFL AM加載到活哺乳動物細胞中的推薦方案。此協(xié)議僅提供指南，應根據(jù)您的具體需求進行修改。

1.    根據(jù)需要準備活細胞。

2.    第二天，將 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 RatioWorks™ BCFL AM 工作溶液加入細胞板中。

注意 如果您的化合物干擾血清，請在上樣染料前用新鮮的HHBS緩沖液（100

孔板為96 μL/孔，25孔板為384 μL/孔）替換生長培養(yǎng)基。

3.    將裝載染料的板在37°C的細胞培養(yǎng)箱中孵育30至60分鐘。

4.    用您選擇的HHBS或緩沖液替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。

5.    使用 HHBS 或您選擇的緩沖液制備復合板。

6.    根據(jù)需要運行pH測定，并使用配備FITC濾光片組的熒光顯微鏡或熒光板讀數(shù)器在Ex / Em = 490 / 535 nm截止值515 nm的同時測量熒光。對于比率測量，在Ex/Em時監(jiān)測熒光1= 430/535 nm 截止值 515 nm 和防爆/電磁2= 505/535 nm 截止值 515 nm。

注意化合物添加量為 50 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）。

注意 測定應在化合物添加后 3 至 5 分鐘內完成。但是，建議至少 8 分鐘進行數(shù)據(jù)收集。

產(chǎn)品訂購信息：

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